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    5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
    2×Tris-Tricine-SDS-PAGE
    彩虹蛋白marker
    1.7-40 kDa
    15-150 kDa
    23-170 kDa
    10-180 kDa
    10-250 kDa
    10-310 kDa
    DNA marker
    20bp DNA ladder
    100bp DNA ladder
    100bp ladder+
    1000bp ladder
    1000bp ladder+
    DL2000bp +
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M5 多糖多酚双超mix(无需提取基因组DNA,针对番茄、烟草、棉花等难扩物种) 
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468.00~3598.00
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品牌: 聚合美 储藏方法: 多糖多酚双超mix长期保存请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少六个月。 直接扩增最佳伴侣,收到后置于常温保存,如果4˚C或-20˚C保存出现结晶,请将该试剂置于 37℃水浴中重新溶解后摇匀使用
货号: MF898


M5 多糖多酚双超mix MF898使用温馨提示


——Tips:大豆、番茄具体操作经验请查看最后附录


一、产品说明:

       1、根据不同物种的基因组GC/AT含量不同,我们设置了几种2x PCRmix以完成实验

       2、对于常见GC含量均衡物种推荐MF848系列

       3、而对于松树、杨树、棉花、黄瓜等基因组GC含量比较低,推荐MF848-AT

       4、某些海洋生物GC含量非常高,推荐MF848-GC

       5、MF848MF848-ATMF848-GC三者唯一的区别就是2x PCR mix不同,其他组分和操作都相同。

       6、MF898——多糖多酚物种、锦葵、杨柳、海洋藻类优先考虑,可尝试使用MF848-AT(注意加氯仿操作)



MF848-01
M5 超光速mix(鼠尾,昆虫,拟南,水稻,玉米,小麦等)
1mL
MF848-10
10x1mL
MF848-100
100x1mL
MF848-AT-01
M5 AT物种超光速mix(特指番茄,土豆,棉花,黄瓜,杨树,松树等)
1mL
MF848-AT-10
10x1mL
MF848-AT-100
100x1mL
MF848-GC-01
M5 GC物种超光速mix(特指褐藻,小球藻等)
1mL
MF848-GC-10
10x1mL
MF848-GC-100
100x1mL
MF898-01
M5 多糖多酚双超mix(无需提取基因组DNA
1mL
MF898-05
5x1mL
MF898-10
10x1mL



二、多糖多酚双超mix (MF898)组成

       1、裂解液叫“扩增最佳伴侣”(MF859

       2、2x PCR 双超mix

       3、ddH2O

三、组分说明与操作建议

1、本产品免基因组DNA提取

      “扩增最佳伴侣”的作用是裂解细胞,释放出DNA当模板(请摸索最适合您实验的最佳伴侣和样本的比例关系)

       Tips

       ①样本太多会超出最佳伴侣的处理上限,导致裂解不完全;

       ②样本太少会造成模板浓过低,导致PCR失败

       ③因为裂解液在特殊的情况下需要20-50uL标准裂解20uL处理体系,可能会有客户单独购买裂解液的需求,所以也可以单独购买

       ④在您收到本产品后,打开包装,将“扩增最佳伴侣”取出放在室温,使用前看看是否有沉淀,一定要确保裂解液没有沉淀,否则按说明书在37溶解澄清后使用。


2、样本处理量建议:

       ①菌液、菌体和液体样本,推荐是10uL处理体系。

       ②而植物和动物组织,推荐是20uL加入1-2 mm2的样本

       ③对于比较难处理的组织可以用50-100uL裂解液。


3、研磨小技巧:

       ① 将黄枪头用火灼烧融化成自制的研磨杵”,0.2mLPCR管中研磨幼嫩组织或者昆虫

       ② 成熟叶片或较大组织,加入50-100uL裂解液在1.5mL 离心管中用研磨旋转挤压破壁;

       ③ 种子或很厚样本(杨树叶片)需要先用液氮研磨,再取少数样本加入50-100uL裂解液;

   务必采用适合的研磨方式来破碎组织,让细胞充分破裂释放DNA   可以通过看裂解液的颜色来判断是否充分破碎


4、建议操作步骤:

       ①加裂解液后,沸水浴处理3-5分钟。如果实验室没有沸水浴,也可以用PCR98处理3-5分钟

       ②12000rpm离心1-2分钟,1-2uLPCR模板,剩余的放在-20保存一个月以上,以备后续再次检测。再次取出做模板时,务必12000rpm离心1-2分钟才能取上清1-2uLPCR模板。

       ③本产品主要针对多糖多酚的植物样本(比如棉花、烟草、番茄、杨树和一些海藻)和动物鼠尾等样本,在沸水浴冷却到室温,加入等体积的氯仿振荡处理,然后12000rpm离心2分钟取上清,效果会有很大改善。

      ④PCR程序设置:PCR延伸速度降下来,平时是5-10/kb 现在要变成30-60/kb因为在粗提物为模版的PCR中速度慢,好比类似在水里跑步和 陆地跑步!

      ⑤PCR循环数:CTAB提取的DNA纯度高,浓度大,而本产品处理的DNA模板是粗提物,循环数要比以前用CTAB模板增加2-3个循环,效果会好很多










M5 多糖多酚双超mix(无需提取基因组DNA说明书


  

产品名称规格货号
M5 多糖多酚双超mix    1 mLMF898-01
M5 多糖多酚双超mix    10 x 1ml MF898-10
M5 多糖多酚双超mix    100 × 1 mLMF898-100

* 支持定制无染料款


储存条件


  1、多糖多酚双超mix长期保存请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少六个月。

     2、直接扩增最佳伴侣,收到后置于常温保存,如果4˚C-20˚C保存出现结晶,请将该试剂置于37℃水浴中重新溶解后摇匀使用。


【产品简介】


  本产品包含聚合美特制的M5 Hiper双超mix直接扩增最佳伴侣,可以迅速裂解酵母、农杆菌、革兰氏阳性菌、放线菌等微生物的细胞壁,短暂煮沸后的液体可以直接作为PCR模板;同样可以用于动植物组织细胞样品的裂解,是各种粗样品直接PCR的必备神器,可兼容普通Taq酶或高保真酶的下游PCR扩增。


  本产品包含聚合美特制Best W5 HiPer High-Fidelity DNA PolymerasedNTPsMgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为Best W5 HiPer High-Fidelity DNA Polymerase比普通Taq酶扩增效率高、错配率低,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好、扩增速度快(30-601kb等优点。

  可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性PCR反应及GC含量较高(>60%)具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR 产物是平末端,纯化后可直接用于TA 载体克隆(货号MF021MF022)

   本产品有含红色染料,在PCR 反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与800 bp 双链DNA 片段相近。


【产品组份】


                                                            储存温度          MF898-01        MF898-10         MF898-100

2x M5 Hiper双超mix (with red dye)       -20˚C                  1 ml                10x1ml              100x1ml

M5 Hiper双超mix直接扩增最佳伴侣     常温                     2 ml               10x2ml              100x2ml

Nuclease-free ddH2O                           常温                     1 ml               10x1ml              100x1ml


【适用范围】


       1.基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。

       2.用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。


【所需试剂】


  使用者仅需准备PCR反应的模板引物等。


***【样本处理方法】***


A、裂解液处理组织样品时取样切勿太多10-20uL裂解液加入1-2mm21-2平方毫米)大小样本为宜!


B、裂解液处理后的用做PCR模板,加入的量不要超过PCR体系的1/10


1、菌液样品

    将培养至对数生长期的菌液(酵母、革兰氏阳性、农杆菌、放线菌培养液等)以菌液和裂解液体积比1:2混合5uL菌液:10uL最佳伴侣),直接沸水浴3-5分钟,短暂离心后取1-2µL作为后续PCR模板。

2、平板上的菌落

  用灭菌枪头挑取少量菌体,加入10 µL最佳伴侣,吹吸混匀,95 ˚C沸水浴3-5 分钟,12000rpm离心1-2分钟,1-2µL作为后续 PCR模板。

3、血液或其他液体样品(尿液、组织液或者各种体液)

     以液体样本和裂解液体积比1:2混合(5uL样本10uL最佳伴侣)95 ˚C煮沸3-5分钟,12000rpm离心1-2分钟,1-2µL作为后续PCR模板

4、植物组织样品(幼嫩叶片,果实、种子、根组织等)

       50uL裂解液加入2-3mm2样本,将固体样品尽量研磨,煮沸3-5分钟,棉花、烟草、杨树、番茄、柑橘多糖多酚类样本,等上述样本冷却到室温加入50uL氯仿,Vortex 10),12000rpm离心2分钟,1-2µL作为后续PCR模板


制备样本小技巧:

       ①、沿用实验室已有处理样本的流程(液氮速冻,冻完尽快打样),原来怎么取样就怎么取,用钢珠怎么打样就怎么打。

       ②、然后尽快用牙签挑取一点打碎的样本到20ul裂解液中,这步非常关键,完全解决了因为客户采样多少带来的油多坏菜问题。

       ③、后续就按我们推荐的95度加热5分钟,然后12000rpm离心2分钟取1-2ul上清做PCR


5、动物组织样品(鼠尾、鼠耳等组织)

20uL裂解液加入2mm2样本,将固体样品尽量研磨煮沸3-5分钟,鼠尾、鼠富含胶质样本,等上述样本冷却到室温加入20uL氯仿,Vortex 1012000rpm离心1-2分钟,1-2µL作为后续PCR模板。

6、 土壤等环境组织样品

20uL裂解液加入2mm22平方毫米)样本,将固体样品尽量研磨95 ˚C煮沸3-5分钟,12000rpm离心1-2分钟,1-2µL作为后续PCR模板。


PCR操作示例】


按下表配制PCR反应体系(冰上操作):
TempLate DNA(上述步骤准备)   
1-2µL
2x M5 Hiper超光速mix (with bLue dye)                        
10 μL
Primer 1 (10 μM)                     
0.5 µL
Primer 2 (10 μM)                     
0.5 µL
NucLease-free ddH2O补足至
20 µL



建议的PCR条件
95°C
3 min.
32-36 *cycLes of

94°C
25 sec.
55–64°C
25 sec.
72°C
30-60sec.** / kb DNA
72°C
5 min.
4°C
forever



PCR程序设置注意事项】

* 以粗提物为模板做PCR,因为模板量更少,PCR循环数应比用CTAB提取DNA做模板2-3个循环

**以粗提物为模板做PCR,杂质比较多,降低扩增速有利于得到稳定结果,建议延伸60/1kb


备注

本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。






以下为附录部分




大豆(豆科)图位克隆或转基因鉴定


细胞壁特性纤维素、果胶、大量角质和蜡质,裂解液和高温加热能够破壁。

是否需要研磨需要充分研磨。

选择货号MF848

样本选择可考虑鉴定完毕后,再移栽阳性苗到土里!

  方案1:平皿上培养2周的幼苗根组织。

         ①根部没有叶绿素,细胞壁特别薄,根尖的细胞密集,处理起来方便;

         ②大豆长出侧根后,2-3条做鉴定不影响苗子存活

         ③鉴定完毕再移栽节省劳动力和实验室温室空间。

  方案2:幼嫩叶片。

   细胞壁较好破碎成熟叶片或者种子,研磨时需要更加使劲,裂解液由20µl变成50µl

  其他选择:如果实验室已经有成熟的样本采集和磨样方法(八联排或者96孔板处理样本),一切照旧,只需在研磨完后向每个样本加入20µl-50µl裂解液(视样本年龄和软硬程度),进行后续加热和离心操作。

处理方法:

1、采集用镊子截取2-3条侧根,或者用打孔器或者剪刀采集2-3mm2叶片到1.5ml离心管中;

Tips

①每采集完一个样本用清水或者75%乙醇清洗镊子、打孔器或者剪刀,然后用纸巾擦干后,方可进行第二个样本采集,以防交叉污染

②等所有样本采集完才进行第二步操作。

③如果采用八联排管或者96孔板处理样本,请确保实验室有相应的离心设备甩板离心机或其他离心机,需要考虑转速问题

2、研磨向每个离心管加入20-50µl裂解液(视样本老嫩软硬程度)利用研磨杵,用力旋转3-5次,根组织捣烂至裂解液变成米白色,叶片尽量捣烂至裂解液变成黄绿色;

3、加热:95 ˚C或沸水浴5分钟;

4、离心:12000rpm离心2分钟,取1-2µl作为后续PCR模板。

5、PCR程序调整1)扩增速度1kb/分钟;2)循环数比平时扩增程序增加2-3个。


制备样本小技巧:

1、沿用实验室已有处理样本的流程(液氮速冻,冻完尽快打样),原来怎么取样就怎么取,用钢珠怎么打样就怎么打。

2、然后尽快用牙签挑取一点打碎的样本到20ul裂解液中,这步非常关键,完全解决了因为客户采样多少带来的油多坏菜问题。

3、后续就按我们推荐的95度加热5分钟,然后12000rpm离心2分钟取1-2ul上清做PCR


经典案例展示:(感谢中国农科院作物所大豆组郭勇老师供图)

                             

                                                                                                                          M       1        2        3


1和2都是超光速mix裂解液处理,3是CTAB提取DNA做模板,同一个PCR程序







   烟草、番茄、马铃薯(茄科)图位克隆或转基因鉴定


细胞壁特性:纤维素、果胶、大量角质和蜡质,细胞内含有大量多糖多酚物质,裂解液和高温加热能够破壁。


是否需要研磨:需要充分研磨。


选择货号:优先选择MF898,可以尝试MF848-AT


片段长度:尽量不要超过500bp,如果大于500bp,请用聚合美超保真mix(MF743)


样本选择:可考虑请鉴定完毕后再移栽阳性苗到土里!


  方案1:平皿上培养2周的幼苗根组织。

         ①根部没有叶绿素,细胞壁特别薄,根尖的细胞密集,处理起来方便;

         ②长出侧根后,2-3条做鉴定不影响苗子存活

         ③鉴定完毕再移栽节省劳动力和实验室温室空间。

  方案2:幼嫩叶片。

   细胞壁较好破碎成熟叶片或者种子,研磨时需要更加使劲,裂解液由20µl变成50µl

  其他选择:如果实验室已经有成熟的样本采集和磨样方法(八联排或者96孔板处理样本),一切照旧,只需在研磨完后向每个样本加入20µl-50µl裂解液(视样本年龄和软硬程度),进行后续加热和离心操作。



***【样本处理方法】***


A、裂解液处理组织样品时取样切勿太多10-20uL裂解液加入1-2mm21-2平方毫米)大小样本为宜!


B、裂解液处理后的用做PCR模板,加入的量不要超过PCR体系的1/10


1、菌液样品

    将培养至对数生长期的菌液(酵母、革兰氏阳性、农杆菌、放线菌培养液等)以菌液和裂解液体积比1:2混合5uL菌液:10uL最佳伴侣),直接沸水浴3-5分钟,短暂离心后取1-2µL作为后续PCR模板。

2、平板上的菌落

  用灭菌枪头挑取少量菌体,加入10 µL最佳伴侣,吹吸混匀,95 ˚C沸水浴3-5 分钟,12000rpm离心1-2分钟,1-2µL作为后续 PCR模板。

3、血液或其他液体样品(尿液、组织液或者各种体液)

     以液体样本和裂解液体积比1:2混合(5uL样本10uL最佳伴侣)95 ˚C煮沸3-5分钟,12000rpm离心1-2分钟,1-2µL作为后续PCR模板

4、植物组织样品(幼嫩叶片,果实、种子、根组织等)

       50uL裂解液加入2-3mm2样本,将固体样品尽量研磨,煮沸3-5分钟,棉花、烟草、杨树、番茄、柑橘多糖多酚类样本,等上述样本冷却到室温加入50uL氯仿,Vortex 10),12000rpm离心2分钟,1-2µL作为后续PCR模板


制备样本小技巧:

       ①、沿用实验室已有处理样本的流程(液氮速冻,冻完尽快打样),原来怎么取样就怎么取,用钢珠怎么打样就怎么打。

       ②、然后尽快用牙签挑取一点打碎的样本到20ul裂解液中,这步非常关键,完全解决了因为客户采样多少带来的油多坏菜问题。

       ③、后续就按我们推荐的95度加热5分钟,然后12000rpm离心2分钟取1-2ul上清做PCR


5、动物组织样品(鼠尾、鼠耳等组织)

        20uL裂解液加入2mm2样本,将固体样品尽量研磨煮沸3-5分钟,鼠尾、鼠富含胶质样本,等上述样本冷却到室温加入20uL氯仿,Vortex 1012000rpm离心1-2分钟,1-2µL作为后续PCR模板。

6、 土壤等环境组织样品

       20uL裂解液加入2mm22平方毫米)样本,将固体样品尽量研磨95 ˚C煮沸3-5分钟,12000rpm离心1-2分钟,1-2µL作为后续PCR模板。



制备样本小技巧:

1、沿用实验室已有处理样本的流程(液氮速冻,冻完尽快打样),原来怎么取样就怎么取,用钢珠怎么打样就怎么打。

2、然后尽快用牙签挑取一点打碎的样本到20ul裂解液中,这步非常关键,完全解决了因为客户采样多少带来的油多坏菜问题。

3、后续就按我们推荐的95度加热5分钟,然后12000rpm离心2分钟取1-2ul上清做PCR



经典案例展示:(感谢华南农业大学农学院周老师课题组美亲供图)





买家选项​​信息数量成交时间